如何選擇二抗

單克隆抗體及多克隆抗體：由單一克隆的細(xì)胞（通常是單一克隆的雜交瘤細(xì)胞）所產(chǎn)生的識別某一抗原表位的單一抗體；多克隆抗體是由多種細(xì)胞分別接觸相應(yīng)抗原而產(chǎn)生的多種抗體的總和，多克隆抗體抗原識別抗原的多個表位。

抗體結(jié)構(gòu)：抗體是由四條肽鏈構(gòu)成的“Y”形對稱的分子，包括兩條重鏈和兩條輕鏈。在“Y”的部位的氨基酸順序在不同的抗體分子中差別很大，是負(fù)責(zé)與抗原進(jìn)行特異性結(jié)合的區(qū)域，稱為可變區(qū)，余下的區(qū)域則稱為恒定區(qū)。

如何選擇二抗?

通常情況下，某一特定的實驗中可能同時有幾種二抗可供選擇，如何能選擇到該實驗的二抗，需要綜合以下幾個方面進(jìn)行考慮：

一抗的物種來源

一抗是在什么物種來源的，相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。例如，如果一抗是在小鼠體內(nèi)制備的，那么你就應(yīng)當(dāng)選擇抗小鼠的二抗，如果一抗是在兔體內(nèi)制備的，那么二抗就應(yīng)當(dāng)是抗兔的抗體。至于二抗本身是在什么動物中制備的對二抗的質(zhì)量并無明顯的影響。

一抗是屬于哪個類或亞類

二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體.

單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗體。

如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標(biāo)記實驗中尤其適合。

如果你不知道一抗是哪一類別或亞類，那么抗小鼠IgG是一個不錯的選擇，因為此種抗體可以識別大多數(shù)類型的IgG免疫球蛋白。